技術(shù)文章
Technical articles(1)復(fù)制方法 供體組大鼠體重150~180g,受體組大鼠體重220~250g,按40mg/kg體重的劑量經(jīng)腹腔注射戊丨巴丨比丨妥丨鈉麻醉,麻醉后動物仰臥固定于手術(shù)板上,常規(guī)消毒腹部手術(shù)區(qū)域并去毛。供體大鼠手術(shù):作肋弓下1.0cm橫行切口人腹,經(jīng)門靜脈內(nèi)注入肝素鈉250U。切開膈肌,沿胸廓兩側(cè)向上翻起。游離升主動脈至降主動脈并分離主動脈弓上3條分支,結(jié)扎兩側(cè)頸總動脈及弓下血管分支,在兩側(cè)鎖骨下動脈分叉點處結(jié)扎切斷。于主動脈瓣遠端結(jié)扎升主動脈,向遠端灌注乳酸林格氏液10ml,切斷升主動脈近端及降主動脈遠端,于右房遠端切斷前腔靜脈,并于無名靜脈分叉處切斷無名靜脈,將胸腺連同主動脈、兩側(cè)鎖骨下動脈、前腔靜脈、無名靜脈及其與胸腺之間的結(jié)締組織整塊切取,放入4℃乳酸林格氏液中修整,結(jié)扎升主動脈端及兩側(cè)無名靜脈遠端,建立完整的血運通路。受體大鼠手術(shù):作右頸前區(qū)縱行切口,游離暴露右頸外靜脈和右頸總動脈,以血管夾夾閉兩條血管近心端,遠心端在血管分叉處結(jié)扎切斷。將游離血管穿入自制套管中,并將斷端外翻套在套管外,結(jié)扎固定。將修整完畢的供體降主動脈和前腔靜脈分別套在受體右頸總動脈和右頸外靜脈套管外,排氣后放開血管夾,結(jié)扎固定,如有分支血管出血,應(yīng)逐一結(jié)扎,固定移植物。術(shù)后連續(xù)7d,按10mg/kg體重劑量靜脈注射環(huán)孢素A以防感染。
(2)模型特點 采用本方法復(fù)制的帶血管胸腺移植模型動物存活率高,供體胸腺切取經(jīng)灌洗后變?yōu)槿榘咨匦陆油ㄑ芎笮叵僮優(yōu)榉奂t色,重建動脈搏動良好,胸腺無腫脹。術(shù)后4周取模型大鼠胸腺標本時移植胸腺無明顯縮小,光鏡下胸腺組織切片觀察見胸腺組織結(jié)構(gòu)基本正常,未見明顯排斥現(xiàn)象。本模型以主動脈作為移植胸腺的供血血管,在進行動、靜脈吻合時,采用了套管技術(shù),大大縮短了血管吻合時間和溫缺血時間,對受體動物打擊小,同時也明顯降低了手術(shù)操作難度。因此,本方法復(fù)制的帶血管胸腺移植大鼠模型與以往胸腺移植模型相比,具有動物成活率高,操作簡便,排斥反應(yīng)小等優(yōu)點。
(3)比較醫(yī)學(xué) 到目前為止,帶血管胸腺移植手術(shù)已用于惡性腫瘤以及重癥肌無力患者的臨床治療。為獲得令人滿意的治療效果,進一步拓展帶血管胸腺移植手術(shù)的治療范圍,選擇和建立合適的帶血管胸腺移植動物模型非常重要。近年來,帶血管胸腺移植動物模型在國內(nèi)外均有研究報道,這些研究主要應(yīng)用大鼠、小鼠、小型豬等進行了帶血管的胸腺移植,但是移植物均采用胸腺的一個葉,胸腺功能未能得到充分發(fā)揮。與以往單葉胸腺移植動物模型相比,本方法建立的帶血管胸腺移植動物模型采用的移植物為整體胸腺,它有利于發(fā)揮移植胸腺的功能,是胸腺移植較為好的動物模型。