胎兒宮內(nèi)生長遲緩動物模型

1 子宮動脈結(jié)扎模型

(1)復(fù)制方法  雌性成年大鼠與雄性大鼠隔夜同籠飼養(yǎng)交配，次日早晨觀察交配后陰栓脫落情況，將發(fā)現(xiàn)陰栓日定為妊娠第1日，然后單籠常規(guī)飼養(yǎng)，自由飲水及進(jìn)食。于妊娠第17日進(jìn)行手術(shù)結(jié)扎子宮子宮角動脈。經(jīng)腹腔按30mg/kg體重的劑量戊丨巴丨比丨妥丨鈉注射麻醉。麻醉后將小鼠仰臥固定于手術(shù)板上，腹部常規(guī)消毒皮膚并脫毛。鋪無菌紗布，沿下腹正中作縱向切口，暴露子宮并用溫生理鹽水紗布保護(hù)子宮，尋找分離子宮角動脈，在動脈結(jié)扎處并行置一0號鋼絲，一并結(jié)扎子宮動脈及鋼絲，然后將鋼絲輕輕抽出，遠(yuǎn)端動脈即可見充盈，但充盈程度不及近端。常規(guī)手術(shù)關(guān)腹后肌注抗生素預(yù)防動物感染。然后動物繼續(xù)飼養(yǎng)至分娩。

(2)模型特點  本模型制作方法的原理主要是通過減少胎兒的供血量來影響胎兒的發(fā)育，其丨大丨優(yōu)勢是可以設(shè)自身對照，子宮內(nèi)前部的胎兒為胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩(Intrauterine Growth Retardation, IUGR)胎兒，后部則為正常胎兒。

(3)比較醫(yī)學(xué)  臨床上當(dāng)孕婦發(fā)生急劇及較的血液供應(yīng)中斷時，?？墒瓜鄳?yīng)部位胎兒死于宮內(nèi)而導(dǎo)致流產(chǎn)和死胎。本模型制作方法經(jīng)改良后，采用與臨床IUGR相近的部分阻斷子宮血流，并使用加鋼絲一并結(jié)扎；但改良方法操作技術(shù)難度較高，結(jié)扎過緊則仍有較高的死胎率，而過松則 IUGR發(fā)生率降低。模型動物的手術(shù)創(chuàng)傷、子宮暴露也可影響造模成功率。采用本方法復(fù)制的模型與其他方法復(fù)制的胎兒宮內(nèi)生長遲緩動物模型相比，產(chǎn)仔數(shù)少、IUGR發(fā)生率低及圍產(chǎn)期死亡率高。

2 營養(yǎng)不良模型

(1)復(fù)制方法  雌性成年大鼠與雄性大鼠隔夜同籠飼養(yǎng)交配，次日早晨觀察交配后陰栓脫落情況，將發(fā)現(xiàn)陰栓日定為妊娠第1日，然后單籠常規(guī)飼養(yǎng)，自由飲水及進(jìn)食。于妊娠后7d給予大鼠低鈉日糧飼養(yǎng)，可使孕鼠血漿腎素活性和醛固酮水平顯著增高，血容量顯著減少，分娩后胎仔體重降低。

(2)模型特點  本方法復(fù)制的胎兒宮內(nèi)生長遲緩動物模型，所依據(jù)的機(jī)制是通過減少胎兒營養(yǎng)物質(zhì)的供給量，從而阻滯胎兒的生長發(fā)育。

(3)比較醫(yī)學(xué)  本模型制作過程中配制實驗飼料為模型成功與否的關(guān)鍵因素，低鈉日糧中營養(yǎng)水平的控制、日糧控制的時間均難以掌握。采用本方法造模時，不同的低營養(yǎng)水平和限飼時間，可對孕鼠IUGR發(fā)生及表現(xiàn)程度產(chǎn)生很大影響。但與其他動物模型相比，本模型IUGR的發(fā)生率較高。通過限制孕鼠妊娠晚期的母體營養(yǎng)所發(fā)生的不勻稱型 IUGR，與臨床上發(fā)生的人類IUGR相一致。

3 腹腔注射放線菌素D模型

(1)復(fù)制方法  將雌性成年大鼠與雄性大鼠同籠飼養(yǎng)交配，于次日早晨觀察交配后陰栓脫落情況，將發(fā)現(xiàn)陰栓日定為妊娠第1日，然后單籠常規(guī)飼養(yǎng)，自由飲水及進(jìn)食。于妊娠第10日，經(jīng)腹腔按0.1μg/g體重的劑量一次性注射放線菌素D，然后繼續(xù)飼養(yǎng)至分娩。

(2)模型特點  放線菌素D能與DNA形成化合物，選擇性抑制RNA和蛋白質(zhì)的合成，抑制細(xì)胞增殖。本方法通過給孕鼠注射放線菌素D，將直接影響其體內(nèi)胎兒和胎盤中細(xì)胞的生長發(fā)育，引起胎盤功能不足，減少對胎兒營養(yǎng)物質(zhì)的供給，從而導(dǎo)致IUGR的發(fā)生。

(3)比較醫(yī)學(xué)  放線菌素D使細(xì)胞的分化發(fā)育受到抑制，導(dǎo)致胎仔細(xì)胞數(shù)目的絕丨對減少，使子代呈均稱性體重減少。本模型制作方法的丨大丨優(yōu)點是操作簡單，容易控制，重復(fù)性好。但放線菌素D是一種化療藥物，毒性較大，一次性大劑量使用對孕鼠和胎鼠均有不良反應(yīng)，模型表現(xiàn)的IUGR與臨床上人類發(fā)生的IUGR在發(fā)生機(jī)制上有差異。

4 被動吸煙模型

(1)復(fù)制方法  雌性成年大鼠與雄性大鼠隔夜同籠飼養(yǎng)交配，次日早晨觀察交配后陰栓脫落情況，將發(fā)現(xiàn)陰栓日定為妊娠第1日，然后單籠常規(guī)飼養(yǎng)，自由飲水及進(jìn)食。于受孕后第2日開始進(jìn)行被動吸煙，方法為將孕鼠連籠置于特制的半封閉木箱中，側(cè)面相對各留一通氣口，以香煙點燃置箱中，每天分別于9am，12am，2pm，4pm各進(jìn)行一次，*d每次燃1支香煙，后10d每次2支，共20d，待其自然分娩。

(2)模型特點  香煙點燃后的煙氣中含有許多有害物質(zhì)，其中對機(jī)體有害的是一氧化碳和尼古丁。一氧化碳經(jīng)過機(jī)體呼吸系統(tǒng)進(jìn)入血液后，可以降低血紅蛋白的攜氧能力，使得機(jī)體處于低氧狀態(tài)；而尼古丁對機(jī)體的不良影響則是刺激血管收縮，造成胎盤血流灌注量下降。一氧化碳和尼古丁作用于孕鼠后，可導(dǎo)致胎盤血液灌注量下降，使子宮內(nèi)胎仔得不到足夠的血液供應(yīng)、氧氣和營養(yǎng)成分。這些有害成分還能影響機(jī)體細(xì)胞的分裂增長，使得胎盤、大腦和肝臟等重要器官發(fā)生一系列的病理生理變化，從而造成IUGR。

(3)比較醫(yī)學(xué)  本模型制作方法比較繁瑣，與其他模型相比耗費時間較長，但其作用比較溫和而且持久，效果較好， IUGR發(fā)生率較高，胎鼠圍產(chǎn)期死亡率低，獲取存活的IUGR仔鼠數(shù)量多。但本模型出現(xiàn)IUGR仔鼠的數(shù)量和程度，與孕鼠每天被動吸煙的數(shù)量、時間及煙霧濃度密切相關(guān)，可根據(jù)實驗研究目的調(diào)整。本方法復(fù)制的胎兒宮內(nèi)生長遲緩動物模型與臨床上發(fā)生的人類IUGR較為一致，具有較為理想的實用研究價值。