技術(shù)文章
Technical articles(1)復(fù)制方法 新西蘭兔,雌雄不拘,體重為2.0~2.5kg。
1)自體血注入 經(jīng)耳緣靜脈注射戊丨巴丨比丨妥丨鈉(按25~30mg/kg體重的劑量)或20%烏拉坦(按5ml/kg體重的劑量)麻醉,左側(cè)臥位固定,剪除手術(shù)區(qū)域毛發(fā),皮膚消毒。切口垂直于顴弓并經(jīng)其中點,上達顳上線,下達顴弓下0.5cm,一次切開直達顴骨鱗部,鉆孔后擴大成窗,充分顯露中顱窩底。剪開硬膜,抬起顎葉,吸除腦脊液,使腦葉塌陷。沿蝶骨大翼探至視神經(jīng)處,將塑料導(dǎo)管剪成1.5cm長,管端放在視神經(jīng)外側(cè)。導(dǎo)管另一端固定在顳肌表面。從耳中央動脈抽取3ml自體動脈血(不加抗凝劑),在10s內(nèi)勻速經(jīng)導(dǎo)管注入,再縫合皮膚。導(dǎo)管埋于皮下。48h后,僅將皮膚縫線拆除,注血后再將導(dǎo)管取出,清創(chuàng)縫合,慶大霉素2萬U/d,連續(xù)肌肉注射3d,防止感染。
2)血管造影法 將兔轉(zhuǎn)為仰臥位固定。以鎖骨為底邊、鎖骨中點上1.0cm為頂點,弧形切開皮膚,切除鎖骨,找到鎖骨下動脈,游離并穿三條引線,遠心端靠近耾骨頭部結(jié)扎耾骨下動脈,其余二條引線僅做環(huán)而不結(jié)扎。動脈近心端靠近胸鎖關(guān)節(jié)處夾閉鎖骨下動脈,用眼科剪將動脈剪一小口,將充滿肝素的導(dǎo)管置入動脈腔內(nèi),結(jié)扎第二結(jié)。去除動脈夾,再將動脈導(dǎo)管向前推移,使其進入主動脈弓,也可將動脈導(dǎo)管送入相應(yīng)動脈內(nèi),再拉緊第三結(jié),而非結(jié)扎。注入60%泛影葡胺5ml后,再將動脈導(dǎo)管緩慢退至第二、三結(jié)之間,結(jié)扎第三結(jié),拔出導(dǎo)管。重復(fù)造影時,仍按上述操作方法進行,鎖骨下動脈長約1.5cm,足夠三次造影。末次造影后處死動物,行大體解剖及病理組織學(xué)檢查。
(2)模型特點 病理解剖見腦池、顱底、大腦凸面均有凝血丨塊分布。HE染色可見血管內(nèi)皮細胞脫失,內(nèi)彈性層皺縮呈齒輪狀。全腦血管造影能清晰顯示頸內(nèi)及椎基動脈系統(tǒng)。按Liszczak法分級(輕度痙攣:收縮在10%~20%;中度痙攣:收縮在20%~30%;重度痙攣:收縮大于30%),血管造影顯示48h后腦血管痙攣的發(fā)生率達93%,重度達71%,其余為中度。二次注血后6d仍見有88%的腦血管痙攣,重度占64%。
(3)比較醫(yī)學(xué) 經(jīng)翼點入路置管法,凝血丨塊分布廣泛,方法簡便易行。由于顳肌下減壓,置入管在顳肌表面及顱底處,不會壓迫顳葉。此方法避免了枕大池注血法的不足,但主要指標(biāo)同枕大池注血法。經(jīng)鎖骨下動脈行全腦血管造影,路徑明顯短于經(jīng)股動脈造影法,又能直接顯露動脈,操作簡單迅速。結(jié)扎鎖骨下動脈,由于側(cè)支循環(huán)能維持腋動脈供血,肢體不會出現(xiàn)退行性變。上述方法適合于遲發(fā)性腦血管痙攣的亞急性或慢性實驗。