技術(shù)文章
Technical articles[造模機(jī)制]
長期喂飼高脂飲食,增加膽固醇和甘油三酯的攝入量,增加血漿富含膽固醇和富含甘油三酯脂蛋白,是高脂血癥模型的造模機(jī)制。還有一些特殊的高脂血癥模型,如:靜脈注射TritonWR-1339可以抑制IPL活性,形成-過性高甘油三酯血癥;橄欖油灌胃或脂肪乳靜脈注射,也能形成一過性高甘油三酯血癥。誘導(dǎo)糖尿病后,一般也伴有高甘油三酯血癥。
[造模方法]
1.高脂飲食喂飼法高脂飲食的組成和制作工藝,及喂飼方法在制備高脂血癥模型時起到了關(guān)鍵作用。目前主要有兩種飼料:合成飼料和混合飼料。因為天然物質(zhì)混合飼料無法*具備動物所需全部營養(yǎng)成分和能量需求,質(zhì)量無法控制,合成飼料已經(jīng)成為上*和通用的誘導(dǎo)高脂血癥的飼料。合成飼料通過能量比添加各種營養(yǎng)成分,不同配方能夠提供動物不同能量需求,使得實驗對照更加嚴(yán)格,如ResearchDietsIne.標(biāo)準(zhǔn)“西方飲食”(膽固醇0.15%,脂肪21%)國內(nèi)主要以混合飼料的基礎(chǔ)飼料為主,再添加豬油和膽固醇來誘導(dǎo)高脂血癥,混合后直接眼飼粉料排除了加工過程的不確定因素,效果較好。由于進(jìn)食量以及能量消耗對飲食誘導(dǎo)的動物模型影響非常大,所以造模和實驗過程中這兩方面的嚴(yán)格控制都是必要的,需要保持飼養(yǎng)環(huán)境的一致性,需要代謝籠來測定動物的代謝指標(biāo)。
2. Triton WR-1339尾靜脈注射法此法-般用于小鼠、大鼠和地鼠.Triton WR-1339是表面活性劑,給予- - 次性尾靜脈注射800mng/kg,血漿甘油三酯線性上升,至2小時達(dá)到高峰。該方法對動物本身損傷較大,一般誘導(dǎo)后不再用于別的實驗。3.橄欖油灌胃法和脂肪乳靜脈注射法一般 根據(jù)動物種類,如小鼠和大鼠,這兩種方法均可使用。家兔一般用靜脈注射脂肪乳,小型豬一般用橄欖油灌胃,而地鼠灌胃比較方便,靜脈注射需要特殊部位。橄欖油一般根據(jù)動物的胃容量,適當(dāng)給子灌胃,不同動物血漿甘油三酯水平高峰時間基本都在3~5小時。靜脈注射一般用20%~-30%脂肪乳,按體重8~10倍的體積量,不同動物都基本在2~4小時血漿甘油三酯水平降到正常范圍。