一、概述:
在細胞內(nèi)蛋白質(zhì)磷酸化是一種重要的翻譯后修飾,由特定位點的蛋白質(zhì)激酶催化把磷酸基團從一個化合物轉(zhuǎn)移到另一個化合物上的過程。調(diào)控著細胞的基本進程,如細胞周期調(diào)控、細胞生長和分化等。質(zhì)譜鑒定蛋白質(zhì)的磷酸化位點是利用蛋白質(zhì)經(jīng)過胰蛋白酶消化后,純化出磷酸化多肽,質(zhì)譜鑒定出磷酸化位點。
二、技術(shù)優(yōu)勢:與傳統(tǒng)的western鑒定磷酸化相比,通過質(zhì)譜鑒定蛋白質(zhì)的磷酸化位點可以定位到氨基酸。
三、技術(shù)服務(wù)流程:
1、質(zhì)譜鑒定(蛋白鑒定)樣品的制備:利用磷酸化抗體免疫共沉淀沉淀出磷酸化蛋白質(zhì)、IMAC純化磷酸化蛋白質(zhì)、表達和純化磷酸化蛋白質(zhì)和放射性同位素標記磷酸化蛋白;
2、蛋白質(zhì)的分離:純化后的磷酸化蛋白質(zhì)經(jīng)過凝膠電泳分離后,割取磷酸化蛋白質(zhì)條帶用胰蛋白酶酶切;
3、質(zhì)譜鑒定(蛋白鑒定)的鑒定:質(zhì)譜鑒定磷酸化位點;
4、實驗報告提交。
四、服務(wù)內(nèi)容:
1、質(zhì)譜鑒定(蛋白鑒定)的分離、純化、割取和酶切;
2、質(zhì)譜分析;數(shù)據(jù)庫檢索;
3、提交質(zhì)譜鑒定(蛋白鑒定)實驗報告。