技術(shù)文章
Technical articles采用物理方法誘導(dǎo)角膜新生血管動(dòng)物模型(1)動(dòng)物模型復(fù)制方法體重為2.5~3.5kg新西蘭兔,沖洗結(jié)膜囊,用地卡因(12.5g/L)術(shù)前點(diǎn)眼3次。開(kāi)瞼器開(kāi)瞼,采用二角針(3/8)穿1-0絲線于上方角膜作3針縫線,縫線上端距角膜緣約2.5mm,縫線埋入角膜基質(zhì)層的長(zhǎng)度約3.0mm。在角膜表面留線頭長(zhǎng)約1.0mm。術(shù)后第3日可見(jiàn)新生血管生長(zhǎng),第18日時(shí)新生血管生長(zhǎng)旺盛。(2)動(dòng)物模型特點(diǎn)角膜新生血管沿縫線兩側(cè)呈局限性生長(zhǎng);沿著縫線方向以增長(zhǎng)為主。其主要機(jī)制是縫線反應(yīng),即表現(xiàn)為炎癥形...
采用化學(xué)方法誘導(dǎo)角膜新生血管動(dòng)物模型(1)動(dòng)物模型復(fù)制方法體重2.5~3.5kg新西蘭兔,體重超過(guò)4.5kg不易誘生出角膜新生血管,采用鹽丨酸氯胺銅(50mg/kg體重的劑量)和氯丙嗪(10mg/kg體重的劑量)經(jīng)肌肉注射麻醉,0.5%鹽酸丙氧苯卡因點(diǎn)眼局麻。用棉簽拭去過(guò)多水分,直徑7mm濾紙片浸泡在濃度1mol/L氫氧化鈉溶液中10~20s后,置于兔角膜中央持續(xù)2min,第1min后,加用4mol/L氫氧化鈉溶液25μl點(diǎn)在濾紙中央,再留置1min。然后用15ml平衡鹽液沖...
間接視神經(jīng)損傷模型(1)動(dòng)物復(fù)制方法體重2.0~2.5kg新西蘭兔,按30mg/kg體重的劑量經(jīng)耳緣靜脈注射戊巴比妥鈉麻醉,將動(dòng)物固定后手術(shù)顯露兩側(cè)眶上緣切跡和眶壁,咬骨鉗咬除眶壁(深7~8mm,寬6mm),頭放在致傷管下,將自制致傷卡頭置于視神經(jīng)孔上方眶板上,致傷球(45g)從致傷管上端自由落下(管長(zhǎng)2m),擊于致傷卡頭,經(jīng)骨板將力傳遞至視神經(jīng)孔致傷神經(jīng),見(jiàn)接光反射消失為致傷成功。(2)動(dòng)物模型特點(diǎn)視神經(jīng)組織表現(xiàn)為部分區(qū)域呈現(xiàn)脫髓鞘改變,組織疏松呈網(wǎng)狀,部分軸突裸露。在神經(jīng)...
視神經(jīng)牽拉傷動(dòng)物模型(1)動(dòng)物復(fù)制方法體重700g左右豚鼠,按30mg/kg體重的劑量經(jīng)腹腔注射戊巴比妥鈉麻醉后,手術(shù)顯微鏡下切開(kāi)外毗,角膜緣處360°切開(kāi),游離結(jié)膜及眼外肌,暴露視神經(jīng)并將其與周圍組織分離。取一無(wú)菌吊帶,中點(diǎn)處剪開(kāi)5mm長(zhǎng)裂縫,將其置于眼球后,用絲線結(jié)扎固定,并使視神經(jīng)向后從裂縫中穿過(guò)。豚鼠固定在立體定位架上,調(diào)節(jié)頭部支撐架,使視神經(jīng)管軸向與牽拉方向一致。將固定于球后的無(wú)菌吊帶兩端以絲線連接到牽拉裝置的氣缸上,由一個(gè)脈沖發(fā)電機(jī)發(fā)出恒定電壓,帶動(dòng)活塞運(yùn)動(dòng),通過(guò)...
1.阿霉素誘導(dǎo)模型(1)復(fù)制方法體重250g左右成年大鼠,經(jīng)腹腔按30mg/kg體重劑量注射戊巴比妥鈉麻醉,麻醉后大鼠仰臥固定于手術(shù)板上,腹部手術(shù)區(qū)常規(guī)消毒、去毛,沿右腹旁切口切開(kāi)皮膚,暴露右側(cè)腎臟,結(jié)扎腎蒂后,切除右腎,常規(guī)手術(shù)縫合切口,關(guān)閉腹腔。15d后,按5mg/kg體重的劑量經(jīng)大鼠尾靜脈注射阿霉素(adriamycin,ADR),12周后即可復(fù)制出CRF模型;如長(zhǎng)期造模則需要觀察28~48周。造模前后將模型大鼠置于代謝籠收集24h尿液,測(cè)定24h尿液量及尿蛋白量;按實(shí)...
1.腎大部分切除法(1)復(fù)制方法體重250g左右成年大鼠,經(jīng)腹腔按30mg/kg體重的劑量注射戊巴比妥鈉麻醉,麻醉后大鼠行仰臥固定,腹部備皮、消毒,沿左腹旁切口切開(kāi)皮膚,暴露左側(cè)腎臟,切開(kāi)上、下極的包膜,上下極分別切除腎臟的1/3,用明膠海綿壓迫創(chuàng)面止血,生理鹽水沖洗,常規(guī)手術(shù)縫合肌層和皮膚,關(guān)閉腹腔。一周后,大鼠用同樣方法麻醉后仰臥固定,沿右腹旁切口切開(kāi)皮膚,暴露右側(cè)腎臟,結(jié)扎腎蒂后,切除右腎,常規(guī)手術(shù)縫合切口,關(guān)閉腹腔。造模前后將模型大鼠置于代謝籠收集24h尿液,測(cè)定24...
神經(jīng)性耳聾動(dòng)物模型(1)復(fù)制方法健康普通級(jí)雜色豚鼠,雌雄不拘,體重為400~500g,耳郭反射靈敏.耳鏡檢查排除外耳、中耳炎癥。方法①:G-菌內(nèi)毒素脂多糖1g/L,顯微鏡下實(shí)驗(yàn)組每只動(dòng)物經(jīng)雙耳鼓膜注入大腸桿菌脂多糖;對(duì)照組注入等量生理鹽水做對(duì)照。方法②:經(jīng)肌肉注射卡那霉素(或慶大霉素)400mg/kg體重,1次/d,共7~10d。分別檢查造模前和造模后1d、10d耳郭聽(tīng)力反射和腦干誘發(fā)電位。處死動(dòng)物,解剖耳顳部組織,從圓窗及蝸尖分別灌注1%硝酸銀或3%戊二醛固定,作耳蝸鋪片及...
自身免疫性內(nèi)耳病動(dòng)物模型(1)復(fù)制方法取4周齡近交系雄性C57BL/6小鼠,以及體重為300~400g,經(jīng)檢查耳郭反射正常,無(wú)中耳感染的豚鼠。豚鼠麻醉后心臟灌注,斷頭取顳骨,在4℃無(wú)菌含1mg/L抑肽酶的10mmol/LTris緩沖液中剝離全部?jī)?nèi)耳膜性組織,勻漿。勻漿液離心,取上清液-20℃凍存;沉淀在含0.5%十二烷基硫酸鈉、0.5%β-巰基乙醇、1%甘油、2mmol/L苯甲丨基丨磺丨酰丨氟、10mmol/LN-己基順丁烯二甲亞胺的50mmol/LTris緩沖液中勻漿,計(jì)算...