技術文章
Technical articles1.迅速滅活內(nèi)源的RNA酶,以防止RNA降解。以下3個方法均可有效使內(nèi)源RNA酶失活:1)用含離液(如胍鹽)的細胞裂解液收獲樣品,并立即勻漿。2)用液氮瞬間凍結樣品。值得特別注意的是:組織塊足夠小,在浸入液氮的瞬間就能凍結,以瞬間令RNA酶失活。3)立即將樣品置于RNAfixer無液氮RNA樣品儲存液中。它是一種水相、無毒的收集試劑,能立即穩(wěn)定并保護完整、未凍結的組織和細胞樣品中的RNA。關鍵要點是組織樣品切片要夠薄(),這樣RNAfixer才能在RNase破壞RNA之前迅速...
Elisa試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)、已知濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關系。Elisa試劑盒試驗過程中需要特別注意的細節(jié)1、試劑準備:試劑都在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存。實驗操作中使用一次性吸頭,避免交叉污染;2.加樣:加樣時,...
血清的保存應該注意以下幾點:(1)生物學實驗中需要長期保存的血清儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,預留體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。(2)熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已解凍的血清。生物學實驗中加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活。除非,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,而且還會影響血清的質(zhì)量。補體...
一、成纖維細胞培養(yǎng)用人或動物胚體為好;動物可用小鼠或雞胚,去頭和內(nèi)臟,剪成小碎塊后,用胰蛋白酶消化法培養(yǎng);如為人胚,可取皮膚培養(yǎng)。幼兒包皮是培養(yǎng)成纖維細胞的很好對象。二、巨噬細胞培養(yǎng)1.實驗前三天,向每只小鼠腹腔內(nèi)注入無菌硫羥乙酸肉湯1ml(勿注入腸內(nèi))。2.引頸殺死動物,手提鼠尾將全鼠浸入70%酒精中3~5秒。3.置動物于解剖臺上,用針頭固定四肢,雙手持鑷撕開皮膚拉向兩側,暴露出腹膜,但勿傷及腹膜壁。4.再用70%酒精擦洗腹膜壁后,用注射器吸10mlEagle液注入腹腔中,...
一、動物交際實驗原理:動物交際實驗利用小鼠熟悉了環(huán)境后,檢測小鼠靠近位于實驗箱中裝有另一只陌生小鼠的金屬籠的時間,來判斷小鼠的社交能力。二、動物交際實驗參數(shù)指標:活動距離、運動速度、測試時間區(qū)域指標各區(qū)域運動路程、逗留時間、靜止時間各區(qū)域(左區(qū)域、右邊區(qū)域、中央?yún)^(qū)域)次進入時間、進入次數(shù)長訪問時間、短訪問時間、進入前總路程、次離開時間特色指標束縛鼠間的接觸次數(shù)、接觸持續(xù)時間、次接觸時間、接近時間與束縛鼠間距離、與束縛鼠間小距離。
細胞培養(yǎng)實驗的基本原理與技術細胞培養(yǎng)實驗可分為:體外培養(yǎng)、組織培養(yǎng)、細胞培養(yǎng)、器官培養(yǎng)。下面就這4種培養(yǎng)方式做一個簡單介紹。體外培養(yǎng):就是將活體結構成分或活的個體從體內(nèi)或其寄生體內(nèi)取出,放在類似于體內(nèi)生存環(huán)境的體外環(huán)境中,讓其生長和發(fā)育的方法。組織培養(yǎng):是指從生物體內(nèi)取出活的組織在體外進行培養(yǎng)的方法。細胞培養(yǎng):是指將活細胞在體外進行培養(yǎng)的方法。器官培養(yǎng):是指從生物體內(nèi)取出的器官、器官的一部分或器官原基在體外進行培養(yǎng)的方法。細胞培養(yǎng)實驗的基本原理與技術現(xiàn)代生物技術一般認為包括基...
Elisa試劑盒是免疫診斷中的一項新技術,現(xiàn)已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據(jù)已經(jīng)使用的結果,認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標本,因此,也適合于血清流行病學調(diào)查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學...
一、動物交際實驗用途用于檢測動物的自閉行為二、動物交際實驗原理:利用小鼠熟悉了環(huán)境后,檢測小鼠靠近位于實驗箱中裝有另一只陌生小鼠的金屬籠的時間,來判斷小鼠的社交能力。三、動物交際實驗參數(shù)指標:活動距離、運動速度、測試時間區(qū)域指標各區(qū)域運動路程、逗留時間、靜止時間各區(qū)域(左區(qū)域、右邊區(qū)域、中央?yún)^(qū)域)次進入時間、進入次數(shù)長訪問時間、短訪問時間、進入前總路程、次離開時間特色指標束縛鼠間的接觸次數(shù)、接觸持續(xù)時間、次接觸時間、接近時間與束縛鼠間距離、與束縛鼠間小距離。